1、尽可能是在蛋白表面
2、保证该段序列不形成α-helix
3、N,C端的肽段比中间的肽段更好
4、避免蛋白内部重复或接近重复段的序列
5、避免同源性太强的肽段
6、交联可以交联在N,C两端,选择依据就是交联在对产生抗体不太重要的一端
7、序列中不能有太多的Pro,但有一两个Pro有好处,可以使肽链结构相对稳定一些,对产生特异性抗体有益。
为了使生产抗体获得最佳效果,仔细地设计抗原多肽是很有必要的,设计应满足一个基本条件:在免疫过程中,该抗原既不会产生过强的免疫反应,同时又能产生出对感兴趣的蛋白有结合能力的抗体。尽管抗原设计是一个很复杂的课题,有诸多需要注意的细节,已超过了我们所能提供的范围,根据我们所积累的经验,有几点关键的基本设计原则可以提供给大家参考:
1、确定抗体的用途(应用)新开展一个研究项目,弄清楚所感兴趣的蛋白的一些基本特性是很有必要的,特别是如果知道蛋白的结构会对选择抗体易于接触和识别的识别区域有很大的帮助。然而,在没有这样精确的结构信息(多数是这种情况)的情况下,了解研究的用途(应用)会影响多肽设计的策略。例如:如果研究重点是集中在蛋白的不同区域,如C端或N端,或在一种特定状态下的蛋白,如磷酸化等,那么按照所需序列设计的多肽和产生的相应的抗体在应用上应该没有太大的困难,然而,蛋白的构象将影响抗体与其识别区域之间的相互作用。这种情况下可能存在的问题是如果在折叠的蛋白中,该识别区域被藏在蛋白的内部,抗体将无法接触到该区域。(无法产生相互作用)。
2、识别区域的选择原则一般说来最理想的抗原性识别区域应具备亲水、位于蛋白表面和结构上易变形性等特点。因为在大多数的天然(自然)环境中,亲水区域倾向于集中在蛋白表面,而疏水区域常常被包裹在蛋白内部,同样道理,抗体只能与在蛋白表面发现的识别区域相互作用,而当这些识别区域有足够的结构易变形性而转移到抗体可接触的位置时,将会与抗体间有很高的亲和性。
3、连续的与不连续的识别区域连续的区域是指由连续的氨基酸序列(残基)构成的识别区域。大多数抗体是针对连续识别区域的,抗体能与这类区域以很高的亲和力相结合表明这段序列不在蛋白内部。不连续的识别区域是代表有一定折叠的一段多肽序列,或是将两段分离开的多肽连在一起的抗体的识别区域。在某些情况下,针对这样不连续识别区域的抗体也能产生,只是用来免疫的抗原多肽必须具备与该不连续识别区域相似的二级结构,而序列的长度需要符合相关的要求。
4、基本建议为了避免识别区域隐藏在蛋白内部的风险,我们通常建议选择蛋白的N,C两端来产生的相应的抗体。因为在完整的蛋白中,N,C两端通常是暴露在蛋白表面的。然而,一定要注意膜蛋白的C端疏水性太强,不适合作为抗原。
5、序列的长度通常我们建议抗原多肽的序列长度在8-20个氨基酸残基之间,如果太短,就有多肽太特殊、所产生的抗体与天然蛋白之间的亲和力(结合能力)不够强的风险,同样,如果序列长度超过20,将有可能引入二级结构,所产生的抗体失去特异性的可能,而且肽链越长,通常合成难度增大,不易获得高纯度的产品。
6、载体蛋白交联的选择
基本原则:将载体蛋白加在远离抗体识别区域的一端,在序列中没有Cys的情况下在N或C端加上Cys为交联的首选方法。
7、常用分析软件 MacVecfor TM ;DNA star TM;PC-Gene TM ,从蛋白序列直接预测抗原表位。
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检测抗多肽反应是否发生的最简单方法就是抗多肽ELISA。有两种技术可以将多肽链接到ELISA板上。第一种方法就是直接将多肽链接到盘上。但如果链接氨基酸恰好是抗原决定簇的一部分,则抗体无法和多肽进一步链接,这样产生假阴性结果的可能性增加。第二种方法则是先将多肽与载体蛋白耦合,然后将多肽-蛋白耦合体链接到ELISA盘上。这种链接方法会使抗体-多肽的结合成功率提高,因为多肽不是直接嵌入盘膜,因而会更加暴露给抗体。这种方法因而更可靠,可重复性更高。需要注意的是,用于该方法的载体蛋白必须不同于用于免疫耦合的载体蛋白。这样会避免血清中抗载体蛋白反应所导致的高背景反应。
当做血清检测时,另一点需要记住的是,由于免疫多肽与自然多肽结构上的差别,检测时的抗多肽反应与试剂的抗多肽反应可能是不同的。任何检测,尤其是测定滴定量以决定收获点时,必须包括针对天然状态下蛋白的检测。当然可以做针对天然状态下蛋白的ELISA;但由于血清在不同检测体系中表现会不一样,因此最好在血清被日常使用的体系中进行蛋白识别鉴定。如果血清将用于免疫沉淀反应,就应该进行针对该反应的检测。
产生具有优良性能的抗体。订购定制的连接多肽,这样您可以增加抗原的免疫原性。如果多肽小于6KD,我们特别推荐做连接。半抗原载体连接选择包括:
• keyhole limpet hemocyanin (KLH)
• bovine serum albumin (BSA)
• thyroglobulin (THY)
• ovalbumin(OVA)
此外,您可以选择多抗原多肽(MAP)连接,它提供一个有分支的赖氨酸核心可替代的多种构型的合成多肽。在决定使用MAP技术还是传统的载体蛋白做连接时,请注意下列指导:
• 半光氨酸会形成非特异二硫键。如果您关注二硫键的构型,使用KLH
• 如果这种多肽是一直被成功地用来生产抗体,效仿已经使用的方法。
• 由于多肽通过C末端连接,而MAP技术有利于N末端或内部的多肽,不推荐使用在严格C末端连接的多肽上。连接载体也可能会导致一些空间障碍。使用KLH做C末端连接。
• 由于在传统的C18 HPLC时,MAP多肽的性能更类似于大的蛋白,因而未提供纯化。
长度
合适的多肽长度有利于优质合成,大部分的多肽抗原要求长度范围在12-16个残基,而且相对容易合成。尽管9个残基或更短的多肽已经是有效的抗原,但是长于12到16氨基酸的多肽可能包含几个决定簇。超过20残基的多肽开始提出了更大的合成挑战。
疏水残基
当设计多肽时,请注意诸如Ala,Cys,Ile,Leu,Met,Phe和Val类残基,它们会增加出现多肽可溶性问题的概率。注意保持疏水残基低于50%
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组蛋白甲基化是表观遗传修饰方式中的一种,参与了异染色质的形成、基因印记、染色体失活和基因转录调控等,具有重要作用.甲基化研究是最近几年的涌现出来的一个新课题;在表观遗传学上,Arg和Lys上的甲基化会使组织蛋白可以在表观遗传上压抑或活跃化基因表现;其他氨基酸上的甲基化修饰会使肽的生物活性或稳定性产生变化,武汉明皓生物提供多种甲基化修饰,以满足您药物设计及研发的需要:
Item:HM Methyl amino acids/甲基化肽
MH 1 {Arg(Me)} 精氨酸单甲基化
MH 2 {ADMA},{Arg(Me)2} asymmetrical 精氨酸对称双甲基化
MH 3 {SDMA},{Arg(Me)2} symmetrical 精氨酸不对称双甲基化
MH 4 {Tyr(Me)} 酪氨酸甲基化
MH 5 {Thr(Me)} 苏氨酸甲基化
MH 6 {Ser(Me)} 丝氨酸甲基化
MH 7 {Cys(Me)}, SMC S-半胱氨酸甲基化
MH 8 {Lys(Me)} 赖氨酸单甲基化
MH 9 {Lys(Me2)} 赖氨酸双甲基化
MH 10 {Lys(Me3)} 赖氨酸三甲基化
MH 11 {L-2-Me-Trp} 色氨酸甲基化
MH 12 {D-2-Me-Trp} D-色氨酸甲基化
MH 13 {Tyr(Et)} 酪氨酸乙基化
MH 14 {D-Tyr(Et)} D-酪氨酸乙基化
另外,甲基化多肽在多抗和单抗的开发方面也是一个重要工具.
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上海柯维化学技术有限公司
专业提供USP,EP,LGC,TRC,MOLCAN,TLC等各类标准品,试剂,耗材,进口原研对照品,欢迎来电垂询!
货期准,到货快,价格优。
电话: 86-021-64609169
QQ: 2857307868
100590 阿托伐他汀钙 100mg
130524 头孢吡肟 100mg
130579 反式头孢吡肟 100m g
111507 蔗糖 50mg
130486 克林霉素磷酸酯 100mg
120927 当归 0.6g
120918 川芎 1g
120904 甘草(甘草) 1g
121057 党参 0.5g
130484 头孢他啶 100mg
100588 匹多莫德 100mg
111535 白黎芦醇 20mg
100542 盐酸噻氯匹定 100mg
130486 克林霉素磷酸酯 100mg
130432 林可霉素 100mg
L-苹果酸 100mg
100968 谷氨酰胺 250mg
100382 紫杉醇 30 mg
100767 盐酸伊立替康 100mg
中检所140673 盐酸赖氨酸 50mg
中检所110797 穿心莲内酯 20mg
中检所130507 氨曲南 100mg
中检所111598 脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯 20mg
中检所100367 奥美拉唑 100mg
44102 大肠埃希菌
26003 金色葡萄球菌
生孢梭菌 --
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1612700 辛伐他汀标准品simvastatin 200 mg
1494931 Pantoprazole Related Compounds D and F Mixture 20 mg
1494942 Pantoprazole Related Compound E 20 mg
1371501 醋酸赖氨酸 L-Lysine Acetate 200mg
1003009 对乙酰氨基酚Acetaminophen (400 mg) 400mg
1004001 Acetanilide Melting Point Standard 1g
1005706 Glacial Acetic Acid 1.5 mL*3
1006801 0 3 ampules
1031503 Amoxicillin 200mg
1031514 Amoxicillin Related Compound A 15 mg
1031547 Amoxicillin Related Compound D 50 mg
1031558 阿莫西林杂质DAmoxicillin Related Compound D 50 mg
1031605 Amoxicillin Related Compound J (15 mg) 15mg
1041904 Aprepitant 50 mg
1041915 Aprepitant Related Compound A 10 mg
1041926 Aprepitant Related Compound B 10 mg
1042601 盐酸精氨酸Arginine Hydrochloride 125mg
1044527 Atorvastatin Related Compound A 20mg
1044538 Atorvastatin Related Compound B 20mg
1044549 Atorvastatin Related Compound C 20mg
1044550 Atorvastatin Related Compound D 10mg
1044571 Atorvastatin Related Compound E 10mg
1056504 1,4-苯醌 1,4-Benzoquinone 200mg
1083008 2-tert-Butyl-4-hydroxyanisole 200mg
1083100 3-tert-Butyl-4-hydroxyanisole 200mg
1086436 氯化钙 Calcium Chloride 1g
1097104 头孢羟氨苄 Cefadroxil 200 mg
1097590 Cefditoren Pivoxil 350mg
1097614 Cefdinir (300 mg) 300mg
1097625 Cefdinir Related Compound A 10 mg
1097782 Cefmetazole 200mg
1098062 Cefprozil (200 mg) 200mg
1098118 头孢匹胺 300mg
1098129 Ceftazidime, Delta-3-Isomer 10mg
1098231 Cefuroxime Axetil Delta-3-Isomers 10 mg
1131009 Cholecalciferol 5 ampules
1133570 Chondroitin Sulfate Sodium 300 mg
1133580 Oversulfated Chondroitin Sulfate 10 mg
1133638 Chromium Picolinate 100 mg
1134007 Chymotrypsin(糜蛋白酶标准品) 300 mg
1140597 Clopidogrel Related Compound B 20 mg
1140600 Clopidogrel Related Compound C 20 mg
1152009 Cyanocobalamin (Vitamin B12) 1.5g
1171455 Dermatan Sulfate 25 mg
1176007 Dexamethasone 125mg
1224992 Donepezil Related Compound A 25 mg
1235503 Endotoxin (Endotoxin Units) 10000USP
1239005 Ergocalciferol 5 ampules
1249789 埃索美拉唑镁Esomeprazole Magnesium 10mg
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世界卫生组织药品标准专家委员会于1975年提出了“有关化学对照品建立、保存及分发的指导原则”。“指导原则”主要是由世界卫生组织化学对照品合作中心(瑞典)起草的,而且该中心负责提供国际化学对照品(ICRS),这些ICRS主要用于国际药典。采用化学对照品(CRS),其目的是为了按药典及药品质量标准要求,获得准确的、可重现的分析结果。
9930387 苯妥英钠 phenytoin 100 mg 179089
9930388 已二酸哌嗪 piperazine adipate 100 mg 197212
9930389 枸橼酸哌嗪 piperazine citrate 100 mg 197213
9930390 吡喹酮 praziquantel 100 mg 194191
9930391 泼尼松龙 prednisolone 100 mg 389029
9930392 醋酸泼尼松龙 prednisolone acetate 100 mg 289030
9930393 泼尼松龙琥珀酸酯 prednisolone hemisuccinate 200 mg 195196
9930394 泼尼松龙磷酸钠 prednisolone sodium phosphate 200 mg 194190
9930395 泼尼松 prednisone 100 mg 167031
9930396 醋酸泼尼松 prednisone acetate 100 mg 169032
9930397 丙磺舒 probenecid 100 mg 192156
9930398 盐酸普鲁卡因 procaine hydrochloride 100 mg 183119
9930399 盐酸丙卡巴肼 procarbazine hydrochloride 100 mg 184120
9930400 黄体酮 progesterone 100 mg 167033
9930402 盐酸普萘洛尔 propranolol hydrochloride 100 mg 187139
9930403 丙基硫尿嘧啶 propylthiouracil 100 mg 185126
9930404 双羟萘酸(恩波酸)噻嘧啶 pyrantel embonate (pyrantel pamoate) 500 mg 192157
9930405 溴吡斯的明 pyridostigmine bromide 100 mg 182110
9930406 利血平 reserpine 100 mg 186133
9930408 维生素B2 riboflavin 250 mg 382035
9930409 利福平 rifampicin 300 mg 191151
9930410 醌式利福平 rifampicin quinone 200 mg 202148
9930412 泛影酸钠 sodium amidotrizoate 100 mg 198221
9930413 色甘酸钠 sodium cromoglicate 100 mg 188140
9930415 盐酸大观霉素 spectinomycin hydrochloride 200 mg 193176
9930416 硫酸链霉素 streptomycin sulfate 100 mg 197215
9930417 磺胺醋酰 sulfacetamide 100 mg 196200
9930419 磺胺甲恶唑 sulfamethoxazole 100 mg 179092
9930420 磺胺甲氧嗪 sulfamethoxypyridazine 100 mg 178079
9930421 磺胺 sulfanilamide 100 mg 179094
9930424 柳氮磺吡啶 sulfasalazine 100 mg 191155
9930425 枸橼酸他莫昔芬 tamoxifen citrate" 100 mg 196208
9930427 庚酸睾酮 testosterone enantate 200 mg 194192
9930428 丙酸睾酮 testosterone propionate 100 mg 167036
9930429 盐酸四环素 tetracycline hydrochloride 200 mg 180095
9930430 氨硫脲 thioacetazone 100 mg 171046
9930431 甲苯磺丁脲 tolbutamide 100 mg 179086
9930432 托萘酯 tolnaftate 100 mg 176074
9930433 邻甲苯磺酰胺 toluene-2-sulfonamide 100 mg 196204
9930434 三甲双酮 trimethadione 200 mg 185125
9930435 甲氧苄啶 trimethoprim 100 mg 179093
9930440 硫酸长春新碱 vincristine sulfate 9.7mg/vial 193181
9930439 华法林 warfarin 100 mg
9930260 珠氯米芬 zuclomifene 50 mg 187137
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产品名称:考布他丁 A-4 磷酸二钠盐
化学名:2-甲氧基-5-[(1Z)-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)乙烯基]苯酚磷酸酯二钠盐
质量标准:企业标准
外观性状:白色固体
CAS:168555-66-6
含量:99%
现货供应,欢迎订购!
www.jyswjs.cn
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产品名称:康普瑞汀
化学名:Z)-2-甲氧基-5-[2-(3,4,5-三甲氧基苯基)乙烯基]-苯酚
外观性状:白色固体
含量:99%
CAS:117048-59-6
外观性状:白色固体
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产品名称:依克立达
化学名:N-(4-(2-(6,7-二甲氧基-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-基)乙基)苯基)-5-甲氧基-9
外观性状:固体
CAS:143664-11-3
质量标准:大于98%
保质期:36(月)
现货供应,欢迎订购!
www.jyswjs.cn
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布洛芬原料药
T027/83325675
布洛芬原料药厂家 布洛芬原料药质量怎么样? 布洛芬原料药包装
布洛芬原料药规格 布洛芬原料药哪里有卖? 布洛芬原料药厂家信息
布洛芬解热镇痛药厂家
布洛芬产品名称】布洛芬
布洛芬产品类别】医药原料和中间体
布洛芬产品含量】99%
布洛芬化学式 】C13H18O2
布洛芬质量标准】BP2000 CP2005
布洛芬包装规格】25公斤纸桶
布洛芬主要作用】具有抗炎、镇痛、解热作用,适用于治疗风湿性关节炎、类风湿性关节炎、骨关节炎、强直性脊椎炎和神经炎等。
供应布洛芬,布洛芬厂家,制造布洛芬原料,解热镇痛布洛芬,治疗血压高布洛芬
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葡醛内酯原料药
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醛内酯原料药厂家价格 葡醛内酯原料药哪里有?
葡醛内酯包装?葡醛内酯原料药生产厂家
又名:肝泰乐、克劳酸
CAS :RN 32449-92-6
分 子 式:C6H8O6
分 子 量 :176.1241
产品含量: 99%
质量标准: 中国药典CP95
包装规格: 25kg/桶
产品说明: 白色结晶性粉末
产品类别: 医药原料和中间体
用途:葡萄糖醛酸内酯与肝脏及肠内毒物结合变为无毒的结合物而排出,起解毒作用,并可阻止糖原分解,肝糖原增加,脂肪贮量减少。用于肝炎、肝硬化、食物及药物中毒。
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