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北京维洛信生物科技有限公司成立于2019年，是北京百泰派克生物科技有限公司旗下病毒技术服务平台，主要为国内外各各科研院所，高校，药企，生物工程类企业提供载体构建、病毒包装等生物学技术服务与产品。基于先进的腺病毒、腺相关病毒与慢病毒技术平台，我们致力于快速、高纯度、高滴度、高感染活力的病毒颗粒制备与生产，并结合客户需求与应用领域，定制高效、高性价比的一站式服务。
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维洛信现推出以下四种病毒包装技术平台，结合专业技术团队，建立了完备的制备、纯化和质控的流程，确保生产的病毒颗粒产品满足各种体内、体外实验的需求。
腺病毒平台：采用应用最广的5型腺病毒与新一代AdMax双质粒共转染系统进行重组腺病毒的生产与包装，能够得到高滴度、高纯度的病毒颗粒，确保满足各种类型的实验研究需求。
腺相关病毒平台：采用三质粒共转染的Helper-free系统在293T细胞中进行AAV的生产与包装，确保满足各种体内/体外实验研究需求。
慢病毒平台：基于国际学术界公认的标准流程，采用第三代包装系统系统在293T细胞中进行慢病毒的制备，确保生产出的慢病毒颗粒可应用于各种类型的体内与体外实验。
Lenti-CAR平台：基于成熟的慢病毒包装技术平台，维洛信现提供CAR慢病毒（Lenti-CAR）包装服务，获得的病毒颗粒可以直接用于CAR-T细胞制备。
多种病毒载体应用
基因过表达
RNA干扰
MicroRNA研究
基因编辑
MicroRNA（miRNA）是一种内生的、短小的非编码单链RNA，它能够同靶点基因的3’UTR互补配对，并导致基因沉默或抑制表达。miRNA网络是转录后表达调控的重要机制之一，参与精细调节体内超过60%的基因。miRNA在进化中高度保守，在很多生物活动中扮演重要角色，miRNA的异常与很多疾病发病密切相关。基于先进的慢病毒技术平台，维洛信现提供介导microRNA表达/抑制的慢病毒制备服务。我们采用第三代包装系统系统在293T细胞中进行慢病毒的生产与包装，并建立了完善的纯化和质控方法，生产的慢病毒颗粒可直接应用于各类体内体外试验。
慢病毒优势：
1. 广泛宿主细胞：与逆转录载体不同，能够感染分裂期与静止期细胞；包膜质粒使用疱疹病毒VSVG蛋白，宿主范围更广，包括神经元细胞、肿瘤细胞、心肌细胞、干细胞等多种类型的细胞。
2. 极强感染能力：慢病毒载体具有极高的感染效率，尤其适用于难转染的神经元细胞、干细胞、原代细胞和其他不分化细胞。
3. 长期稳定表达：外源基因整合入基因组，实现持久性表达，可应用于构建稳定细胞系、制备转基因动物等。
4. 低免疫原性：体内实验不易造成非特异性反应与免疫抑制。
5. 高安全系数：尚未发现对人的致病性，已被应用于临床治疗；采用三质粒包装系统，去除致病基因和辅助序列，包装质粒和载体质粒尽量降低同源性，进一步提高了生物安全性。
服务流程：
1. 方案沟通
2. 基因克隆：根据目标miR，将其pri-miR及上下游构建入慢病毒转移质粒（miR表达）/设计miR封闭序列，并构建入慢病毒转移质粒（miR抑制）；测序验证
3. 病毒包装：三代慢病毒包装系统（转移质粒 + 包装质粒 + 包膜质粒）共转染入293T细胞
4. 收毒：48 h、72 h孵育后收获培养上清
5. 纯化浓缩：超速离心+超滤， 去除杂质蛋白和DNA；根据不同要求，我们还可应用切向流过滤、离子交换层析、蔗糖梯度离心等方式进一步纯化与浓缩
6. 质量控制：
- 多重酶切质粒鉴定
- p24 ELISA核心蛋白定量
- 细胞转导检测（带有荧光标签）
- qPCR检测病毒滴度
交付内容：
定制慢病毒颗粒
对照病毒（可用于转导测试）
详细实验报告
维洛信慢病毒平台：
1. 三代慢病毒包装系统与严格制备工艺，力求获取最优滴度、活性、纯度与一致性的慢病毒产品
2. 多种优化启动子（CMV, mCMV, CAG, PGK, Ubc等）与报告基因（EGFP、mCherry、EYFP等）可供选择，满足您的不同需求
3. 滴度高：维洛信可提供108~109 TU/ml及以上滴度的病毒，满足大部分实验的使用要求
4. 灵活生产：我们提供体外应用级别与体内应用级别各种规格的病毒（小规格、中规格、大规格）的制备服务
5. 具有竞争力的价格与货期
针对不同应用方向，我们提供以下慢病毒制备服务：
用于基因过表达的慢病毒制备>>
用于RNA干扰的慢病毒制备>>
用于基因编辑的慢病毒制备>>
基于先进的腺病毒技术平台，维洛信现提供AAV定制服务，可适用于多种基因操作与编辑策略。我们采用三质粒共转染的Helper-free系统在293T细胞中进行AAV的生产与包装，并建立了完善的纯化与质控方法，生产的AAV颗粒可直接应用于各类体内体外实验。
- 基于CRISPR的基因敲除的AAV载体构建与包装
CRISPR系统是目前最常用的基因打靶系统之一。维洛信提供基于CRISPR系统的AAV载体构建预包装服务，根据目的基因设计short guide RNA (sgRNA) 序列并构建入我们专有的AAV载体pAAV-CR，进而断裂DNA双链，实现对基因的精确敲除。
-Cre-LoxP重组系统的AAV载体构建与包装
将Cre-LoxP重组系统与具有高效和特异感染的AAV载体结合，实现目的基因组织和时间的可控表达。
-Tet-on转录系统的AAV载体构建与包装
四环素转录调控系统（Tetracycline-Controlled Transcriptional Activation, Tet-on/off）是能够定时开启/关闭特定基因表达的转录调控系统。维洛信提供Tet-on转录系统的AAV载体构建与包装服务，实现基因的诱导表达。
腺相关病毒优势：
1. 宿主范围广：可感染分裂细胞与非分裂细胞；多种亚型具有多种组织亲嗜性，可以应用于神经系统、心肌、肝脏、眼睛、肌肉等定位注射。
2. 扩散性佳：体积小、滴度高，具有远优于腺病毒与慢病毒的扩散性，可穿越血脑屏障，是优秀的神经元与胶质细胞感染工具。
3. 安全系数高：迄今未发现野生型AAV对人体致病；ITR与rep/cap基因分别由独立的质粒传导表达，进一步去除感染风险。
4. 免疫原性低：仅4.7kb的基因组便于重组DNA技术操作，在动物实验中局部大剂量使用极少造成非特异性反应与免疫抑制。
5. 长时稳定表达：AAV感染可介导外源基因发生低频（<2%）定向整合，绝大多数重组AAV感染细胞后不会整合入基因组，而是在宿主细胞内形成伴随体，因此AAV能够介导外源基因长期、稳定的复制转录。
6. 稳定性好：AAV在60℃不会被灭活，能抵抗多种有机溶剂的处理（例如氯仿）
不同的AAV亚型具有不同的组织嗜亲性，我们推荐根据实验靶向的器官/细胞，选择具有相应亲和性的AAV亚型进行构建，能够有效提高感染效率。
| 血清型 | 组织嗜亲性 |
|---|---|
| AAV1 | 肌肉，心脏，骨骼肌（包括心肌），神经组织 |
| AAV2 | 中枢神经，肌肉，肝脏，脑组织，眼 |
| AAV3 | 肌肉，肝脏，肺，眼 |
| AAV4 | 中枢神经，肌肉，脑，眼 |
| AAV5 | 中枢神经，肺，眼，关节滑膜，胰腺 |
| AAV6 | 心脏，肺 |
| AAV7 | 肝脏，肌肉 |
| AAV8 | 中枢神经，肝脏，肌肉，眼 |
| AAV9 | 中枢神经，肝脏，心脏，肌肉，肺（包括肺泡），可穿过血脑/胎盘屏障 |
| DJ | 肝脏，肾脏，肺，视网膜 |
| DJ/8 | 中枢神经，肝脏，肌肉，眼 |
| Rh10 | 中枢神经，肝脏，心脏，肌肉，肺 |
| PHP.eB | 中枢神经 |
| PHP. B | 中枢神经（神经元，神经胶质） |
| PHP.S | 中枢神经（外周神经元） |
| Retro | 中枢神经 |
| AAV-pan | 胰腺 |
服务流程：
1. 方案沟通
2. 基因克隆：将目的基因片段构建入我们的专有AAV转移质粒，测序验证
3. 病毒包装：三质粒共转染（转移质粒+病毒包装质粒+辅助质粒）入293T细胞
4. 收毒：72h孵育后分别收获培养上清与细胞沉淀中的病毒
5. 纯化浓缩：碘克沙醇梯度离心，高效的分离空衣壳病毒与细胞杂质，将具备感染力的病毒富集到90%以上；超滤浓缩
6. 质量控制：
- 多重酶切质粒鉴定
- qPCR检测病毒滴度
- SDS-PAGE/考马斯亮蓝测定纯度
- 细胞转导检测（带有荧光标签）
- HPLC/内毒素检测/微生物检测（高纯度AAV可选）
交付内容：
定制AAV病毒颗粒
对照病毒（可用于转导测试）
详细实验报告
维洛信腺相关病毒平台：
1. 创新性AAV载体与严格制备工艺，力求获取最优滴度、活性、纯度与一致性的AAV产品
2. 多种AAV血清型可供选择（AAV1, AAV2, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9...）
3. 20余种组织特异性启动子（CMV, CamkIIα, Human Synapsin, GFAP等）与多种报告基因（EGFP、mCherry、RFP，EYFP等）可供选择，满足您的不同需求
4. 滴度高：维洛信可提供10^12~10^13V.G/ml及以上滴度的病毒，满足大部分实验的使用要求
5. 灵活生产：我们提供体外应用级别与体内应用级别各种规格的病毒（小规格、中规格、大规格）的制备服务
6. 具有竞争力的价格与货期
针对不同应用方向，我们还提供以下AAV制备服务：
用于基因过表达的腺相关病毒（AAV）制备>>
用于RNA干扰的腺相关病毒（AAV）制备>>
用于表达/抑制microRNA的腺相关病毒（AAV）制备>>
基于国际学术界公认的标准流程，维洛信现提供介导RNA干扰的慢病毒制备服务。我们采用第三代包装系统系统在293T细胞中进行慢病毒的生产与包装，并建立了完善的纯化和质控方法，生产的慢病毒颗粒可直接应用于各类体内体外试验。
RNA干扰（RNA interference, RNAi）是借助双链RNA（dsRNA）引发的同源mRNA高效特异性降解、导致基因沉默的现象。RNAi技术即为在靶细胞中导入外源dsRNA，生成小分子干扰RNA（siRNA）以达到特异性剔除或沉默某个基因的表达。将针对siRNA设计的shRNA装载入慢病毒载体中，进而高效感染细胞或动物，是人工RNAi的一项主要技术。借助慢病毒的感染能力，不仅宿主细胞范围大大扩大，shRNA也能够更加高效、稳定的转导入细胞，实现长期稳定的RNAi效果。
慢病毒优势：
1. 广泛宿主细胞：与逆转录载体不同，能够感染分裂期与静止期细胞；包膜质粒使用疱疹病毒VSVG蛋白，宿主范围更广，包括神经元细胞、肿瘤细胞、心肌细胞、干细胞等多种类型的细胞。
2. 极强感染能力：慢病毒载体具有极高的感染效率，尤其适用于难转染的神经元细胞、干细胞、原代细胞和其他不分化细胞。
3. 长期稳定表达：外源基因整合入基因组，实现持久性表达，可应用于构建稳定细胞系、制备转基因动物等。
4. 低免疫原性：体内实验不易造成非特异性反应与免疫抑制。
5. 高安全系数：尚未发现对人的致病性，已被应用于临床治疗；采用三质粒包装系统，去除致病基因和辅助序列，包装质粒和载体质粒尽量降低同源性，进一步提高了生物安全性。
服务流程：
1. 方案沟通
2. 基因克隆：针对目的基因ORF设计3-4个靶点，将对应shRNA构建入我们的专有慢病毒转移质粒，测序验证
3. 病毒包装：三代慢病毒包装系统（转移质粒pLV-MNG + 包装质粒 + 包膜质粒）共转染入293T细胞
4. 收毒：48 h、72 h孵育后收获培养上清
5. 纯化浓缩：超速离心+超滤， 去除杂质蛋白和DNA；根据不同要求，我们还可应用切向流过滤、离子交换层析、蔗糖梯度离心等方式进一步纯化与浓缩
6. 质量控制：
- 多重酶切质粒鉴定
- p24 ELISA核心蛋白定量
- 细胞转导检测（带有荧光标签）
- qPCR检测病毒滴度
交付内容：
定制慢病毒颗粒
对照病毒（可用于转导测试）
详细实验报告
维洛信慢病毒平台：
1. 三代慢病毒包装系统与严格制备工艺，力求获取最优滴度、活性、纯度与一致性的慢病毒产品
2. 多种优化启动子（CMV, H1, U6等）与报告基因（EGFP、mCherry、EYFP等）或药筛基因（Neo, Puro, Hygromycin等）可供选择，满足您的不同需求
3. 滴度高：维洛信可提供108~109 TU/ml及以上滴度的病毒，满足大部分实验的使用要求
4. 灵活生产：我们提供体外应用级别与体内应用级别各种规格的病毒（小规格、中规格、大规格）的制备服务
5. 具有竞争力的价格与货期
针对不同应用方向，我们提供以下慢病毒制备服务：
用于基因过表达的慢病毒制备>>
用于表达/抑制microRNA的慢病毒制备>>
用于基因编辑的慢病毒制备>>
基于国际学术界公认的标准流程，维洛信现提供介导基因过表达的慢病毒制备服务。我们采用第三代包装系统系统在293T细胞中进行慢病毒的生产与包装，并建立了完善的纯化和质控方法，生产的慢病毒颗粒可直接应用于各类体内体外试验。
慢病毒优势：
1. 广泛宿主细胞：与逆转录载体不同，能够感染分裂期与静止期细胞；包膜质粒使用疱疹病毒VSVG蛋白，宿主范围更广，包括神经元细胞、肿瘤细胞、心肌细胞、干细胞等多种类型的细胞。
2. 极强感染能力：慢病毒载体具有极高的感染效率，尤其适用于难转染的神经元细胞、干细胞、原代细胞和其他不分化细胞。
3. 长期稳定表达：外源基因整合入基因组，实现持久性表达，可应用于构建稳定细胞系、制备转基因动物等。
4. 低免疫原性：体内实验不易造成非特异性反应与免疫抑制。
5. 高安全系数：尚未发现对人的致病性，已被应用于临床治疗；采用三质粒包装系统，去除致病基因和辅助序列，包装质粒和载体质粒尽量降低同源性，进一步提高了生物安全性。
服务流程：
1. 方案沟通
2. 基因克隆：将目的基因（Gene of Interest）构建入我们的专有慢病毒转移质粒，测序验证
3. 病毒包装：三代慢病毒包装系统（转移质粒pLV-MNG + 包装质粒 + 包膜质粒）共转染入293T细胞
4. 收毒：48 h、72 h孵育后收获培养上清
5. 纯化浓缩：超速离心+超滤， 去除杂质蛋白和DNA；根据不同要求，我们还可应用切向流过滤、离子交换层析、蔗糖梯度离心等方式进一步纯化与浓缩
6. 质量控制：
- 多重酶切质粒鉴定
- p24 ELISA核心蛋白定量
- 细胞转导检测（带有荧光标签）
- qPCR检测病毒滴度
交付内容：
定制慢病毒颗粒
对照病毒（可用于转导测试）
详细实验报告
维洛信慢病毒平台：
1. 三代慢病毒包装系统与严格制备工艺，力求获取最优滴度、活性、纯度与一致性的慢病毒产品
2. 多种优化启动子（CMV, mCMV, CAG, PGK, Ubc等）与报告基因（EGFP、mCherry、EYFP等）或药筛基因（Neo, Puro, Hygromycin等）可供选择，满足您的不同需求
3. 滴度高：维洛信可提供108~109 TU/ml及以上滴度的病毒，满足大部分实验的使用要求
4. 灵活生产：我们提供体外应用级别与体内应用级别各种规格的病毒（小规格、中规格、大规格）的制备服务
5. 具有竞争力的价格与货期
针对不同应用方向，我们提供以下慢病毒制备服务：
用于RNA干扰的慢病毒制备>>
用于表达/抑制microRNA的慢病毒制备>>
用于基因编辑的慢病毒制备>>
MicroRNA（miRNA）是一种内生的、短小的非编码单链RNA，它能够同靶点基因的3’UTR互补配对，并导致基因沉默或抑制表达。miRNA网络是转录后表达调控的重要机制之一，参与精细调节体内超过60%的基因。miRNA在进化中高度保守，在很多生物活动中扮演重要角色，miRNA的异常与很多疾病发病密切相关。基于先进的慢病毒技术平台，维洛信现提供介导microRNA表达/抑制的慢病毒制备服务。我们采用第三代包装系统系统在293T细胞中进行慢病毒的生产与包装，并建立了完善的纯化和质控方法，生产的慢病毒颗粒可直接应用于各类体内体外试验。
慢病毒优势：
1. 广泛宿主细胞：与逆转录载体不同，能够感染分裂期与静止期细胞；包膜质粒使用疱疹病毒VSVG蛋白，宿主范围更广，包括神经元细胞、肿瘤细胞、心肌细胞、干细胞等多种类型的细胞。
2. 极强感染能力：慢病毒载体具有极高的感染效率，尤其适用于难转染的神经元细胞、干细胞、原代细胞和其他不分化细胞。
3. 长期稳定表达：外源基因整合入基因组，实现持久性表达，可应用于构建稳定细胞系、制备转基因动物等。
4. 低免疫原性：体内实验不易造成非特异性反应与免疫抑制。
5. 高安全系数：尚未发现对人的致病性，已被应用于临床治疗；采用三质粒包装系统，去除致病基因和辅助序列，包装质粒和载体质粒尽量降低同源性，进一步提高了生物安全性。
服务流程：
1. 方案沟通
2. 基因克隆：根据目标miR，将其pri-miR及上下游构建入慢病毒转移质粒（miR表达）/设计miR封闭序列，并构建入慢病毒转移质粒（miR抑制）；测序验证
3. 病毒包装：三代慢病毒包装系统（转移质粒 + 包装质粒 + 包膜质粒）共转染入293T细胞
4. 收毒：48 h、72 h孵育后收获培养上清
5. 纯化浓缩：超速离心+超滤， 去除杂质蛋白和DNA；根据不同要求，我们还可应用切向流过滤、离子交换层析、蔗糖梯度离心等方式进一步纯化与浓缩
6. 质量控制：
- 多重酶切质粒鉴定
- p24 ELISA核心蛋白定量
- 细胞转导检测（带有荧光标签）
- qPCR检测病毒滴度
交付内容：
定制慢病毒颗粒
对照病毒（可用于转导测试）
详细实验报告
维洛信慢病毒平台：
1. 三代慢病毒包装系统与严格制备工艺，力求获取最优滴度、活性、纯度与一致性的慢病毒产品
2. 多种优化启动子（CMV, mCMV, CAG, PGK, Ubc等）与报告基因（EGFP、mCherry、EYFP等）可供选择，满足您的不同需求
3. 滴度高：维洛信可提供108~109 TU/ml及以上滴度的病毒，满足大部分实验的使用要求
4. 灵活生产：我们提供体外应用级别与体内应用级别各种规格的病毒（小规格、中规格、大规格）的制备服务
5. 具有竞争力的价格与货期
针对不同应用方向，我们提供以下慢病毒制备服务：
用于基因过表达的慢病毒制备>>
用于RNA干扰的慢病毒制备>>
用于基因编辑的慢病毒制备>>
基于先进的腺病毒技术平台，维洛信现提供AAV定制服务，可适用于多种基因操作与编辑策略。我们采用三质粒共转染的Helper-free系统在293T细胞中进行AAV的生产与包装，并建立了完善的纯化与质控方法，生产的AAV颗粒可直接应用于各类体内体外实验。
- 基于CRISPR的基因敲除的AAV载体构建与包装
CRISPR系统是目前最常用的基因打靶系统之一。维洛信提供基于CRISPR系统的AAV载体构建预包装服务，根据目的基因设计short guide RNA (sgRNA) 序列并构建入我们专有的AAV载体pAAV-CR，进而断裂DNA双链，实现对基因的精确敲除。
-Cre-LoxP重组系统的AAV载体构建与包装
将Cre-LoxP重组系统与具有高效和特异感染的AAV载体结合，实现目的基因组织和时间的可控表达。
-Tet-on转录系统的AAV载体构建与包装
四环素转录调控系统（Tetracycline-Controlled Transcriptional Activation, Tet-on/off）是能够定时开启/关闭特定基因表达的转录调控系统。维洛信提供Tet-on转录系统的AAV载体构建与包装服务，实现基因的诱导表达。
腺相关病毒优势：
1. 宿主范围广：可感染分裂细胞与非分裂细胞；多种亚型具有多种组织亲嗜性，可以应用于神经系统、心肌、肝脏、眼睛、肌肉等定位注射。
2. 扩散性佳：体积小、滴度高，具有远优于腺病毒与慢病毒的扩散性，可穿越血脑屏障，是优秀的神经元与胶质细胞感染工具。
3. 安全系数高：迄今未发现野生型AAV对人体致病；ITR与rep/cap基因分别由独立的质粒传导表达，进一步去除感染风险。
4. 免疫原性低：仅4.7kb的基因组便于重组DNA技术操作，在动物实验中局部大剂量使用极少造成非特异性反应与免疫抑制。
5. 长时稳定表达：AAV感染可介导外源基因发生低频（<2%）定向整合，绝大多数重组AAV感染细胞后不会整合入基因组，而是在宿主细胞内形成伴随体，因此AAV能够介导外源基因长期、稳定的复制转录。
6. 稳定性好：AAV在60℃不会被灭活，能抵抗多种有机溶剂的处理（例如氯仿）
不同的AAV亚型具有不同的组织嗜亲性，我们推荐根据实验靶向的器官/细胞，选择具有相应亲和性的AAV亚型进行构建，能够有效提高感染效率。
| 血清型 | 组织嗜亲性 |
|---|---|
| AAV1 | 肌肉，心脏，骨骼肌（包括心肌），神经组织 |
| AAV2 | 中枢神经，肌肉，肝脏，脑组织，眼 |
| AAV3 | 肌肉，肝脏，肺，眼 |
| AAV4 | 中枢神经，肌肉，脑，眼 |
| AAV5 | 中枢神经，肺，眼，关节滑膜，胰腺 |
| AAV6 | 心脏，肺 |
| AAV7 | 肝脏，肌肉 |
| AAV8 | 中枢神经，肝脏，肌肉，眼 |
| AAV9 | 中枢神经，肝脏，心脏，肌肉，肺（包括肺泡），可穿过血脑/胎盘屏障 |
| DJ | 肝脏，肾脏，肺，视网膜 |
| DJ/8 | 中枢神经，肝脏，肌肉，眼 |
| Rh10 | 中枢神经，肝脏，心脏，肌肉，肺 |
| PHP.eB | 中枢神经 |
| PHP. B | 中枢神经（神经元，神经胶质） |
| PHP.S | 中枢神经（外周神经元） |
| Retro | 中枢神经 |
| AAV-pan | 胰腺 |
服务流程：
1. 方案沟通
2. 基因克隆：将目的基因片段构建入我们的专有AAV转移质粒，测序验证
3. 病毒包装：三质粒共转染（转移质粒+病毒包装质粒+辅助质粒）入293T细胞
4. 收毒：72h孵育后分别收获培养上清与细胞沉淀中的病毒
5. 纯化浓缩：碘克沙醇梯度离心，高效的分离空衣壳病毒与细胞杂质，将具备感染力的病毒富集到90%以上；超滤浓缩
6. 质量控制：
- 多重酶切质粒鉴定
- qPCR检测病毒滴度
- SDS-PAGE/考马斯亮蓝测定纯度
- 细胞转导检测（带有荧光标签）
- HPLC/内毒素检测/微生物检测（高纯度AAV可选）
交付内容：
定制AAV病毒颗粒
对照病毒（可用于转导测试）
详细实验报告
维洛信腺相关病毒平台：
1. 创新性AAV载体与严格制备工艺，力求获取最优滴度、活性、纯度与一致性的AAV产品
2. 多种AAV血清型可供选择（AAV1, AAV2, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9...）
3. 20余种组织特异性启动子（CMV, CamkIIα, Human Synapsin, GFAP等）与多种报告基因（EGFP、mCherry、RFP，EYFP等）可供选择，满足您的不同需求
4. 滴度高：维洛信可提供10^12~10^13V.G/ml及以上滴度的病毒，满足大部分实验的使用要求
5. 灵活生产：我们提供体外应用级别与体内应用级别各种规格的病毒（小规格、中规格、大规格）的制备服务
6. 具有竞争力的价格与货期
针对不同应用方向，我们还提供以下AAV制备服务：
用于基因过表达的腺相关病毒（AAV）制备>>
用于RNA干扰的腺相关病毒（AAV）制备>>
用于表达/抑制microRNA的腺相关病毒（AAV）制备>>
腺相关病毒（Adeno-associated virus, AAV）是一种无被膜、具有20面体结构的病毒，含有4.7kb的线状单链DNA基因组。AAV具备宿主范围广、安全性高、免疫原性低、长期稳定表达等优点，是一种理想的基因治疗工具，广泛应用于各种领域的基础研究与临床试验中。
基于先进的腺病毒技术平台，维洛信现提供基因过表达AAV制备服务。我们采用三质粒共转染的Helper-free系统在293T细胞中进行AAV的生产与包装，并建立了完善的纯化与质控方法，生产的AAV颗粒可直接应用于各类体内体外实验。
腺相关病毒优势：
1. 宿主范围广：可感染分裂细胞与非分裂细胞；多种亚型具有多种组织亲嗜性，可以应用于神经系统、心肌、肝脏、眼睛、肌肉等定位注射。
2. 扩散性佳：体积小、滴度高，具有远优于腺病毒与慢病毒的扩散性，可穿越血脑屏障，是优秀的神经元与胶质细胞感染工具。
3. 安全系数高：迄今未发现野生型AAV对人体致病；ITR与rep/cap基因分别由独立的质粒传导表达，进一步去除感染风险。
4. 免疫原性低：仅4.7kb的基因组便于重组DNA技术操作，在动物实验中局部大剂量使用极少造成非特异性反应与免疫抑制。
5. 长时稳定表达：AAV感染可介导外源基因发生低频（<2%）定向整合，绝大多数重组AAV感染细胞后不会整合入基因组，而是在宿主细胞内形成伴随体，因此AAV能够介导外源基因长期、稳定的复制转录。
6. 稳定性好：AAV在60℃不会被灭活，能抵抗多种有机溶剂的处理（例如氯仿）
不同的AAV亚型具有不同的组织嗜亲性，我们推荐根据实验靶向的器官/细胞，选择具有相应亲和性的AAV亚型进行构建，能够有效提高感染效率。
服务流程：
1. 方案沟通
2. 基因克隆：将目的基因cDNA（Gene of Interest）构建入我们的专有AAV转移质粒，测序验证
3. 病毒包装：三质粒共转染（转移质粒+病毒包装质粒+辅助质粒）入293T细胞
4. 收毒：72h孵育后分别收获培养上清与细胞沉淀中的病毒
5. 纯化浓缩：碘克沙醇梯度离心，高效的分离空衣壳病毒与细胞杂质，将具备感染力的病毒富集到90%以上；超滤浓缩
6. 质量控制：
- 多重酶切质粒鉴定
- qPCR检测病毒滴度
- SDS-PAGE/考马斯亮蓝测定纯度
- 细胞转导检测（带有荧光标签）
- HPLC/内毒素检测/微生物检测（高纯度AAV可选）
交付内容：
定制AAV病毒颗粒
对照病毒（可用于转导测试）
详细实验报告
维洛信腺相关病毒平台：
1. 创新性AAV载体与严格制备工艺，力求获取最优滴度、活性、纯度与一致性的AAV产品
2. 多种AAV血清型可供选择（AAV1, AAV2, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9...）
3. 20余种组织特异性启动子（CMV, CamkIIα, Human Synapsin, GFAP等）与多种报告基因（EGFP、mCherry、RFP，EYFP等）可供选择，满足您的不同需求
4. 滴度高：维洛信可提供10^12~10^13V.G/ml及以上滴度的病毒，满足大部分实验的使用要求
5. 灵活生产：我们提供体外应用级别与体内应用级别各种规格的病毒（小规格、中规格、大规格）的制备服务
6. 具有竞争力的价格与货期
针对不同应用方向，我们还提供以下AAV制备服务：
用于RNA干扰的腺相关病毒（AAV）制备>>
用于表达/抑制microRNA的腺相关病毒（AAV）制备>>
用于基因编辑的腺相关病毒（AAV）制备>>
维洛信现推出以下四种病毒包装技术平台，结合专业技术团队，建立了完备的制备、纯化和质控的流程，确保生产的病毒颗粒产品满足各种体内、体外实验的需求。
腺病毒平台：采用应用最广的5型腺病毒与新一代AdMax双质粒共转染系统进行重组腺病毒的生产与包装，能够得到高滴度、高纯度的病毒颗粒，确保满足各种类型的实验研究需求。
腺相关病毒平台：采用三质粒共转染的Helper-free系统在293T细胞中进行AAV的生产与包装，确保满足各种体内/体外实验研究需求。
慢病毒平台：基于国际学术界公认的标准流程，采用第三代包装系统系统在293T细胞中进行慢病毒的制备，确保生产出的慢病毒颗粒可应用于各种类型的体内与体外实验。
Lenti-CAR平台：基于成熟的慢病毒包装技术平台，维洛信现提供CAR慢病毒（Lenti-CAR）包装服务，获得的病毒颗粒可以直接用于CAR-T细胞制备。
多种病毒载体应用
基因过表达
RNA干扰
MicroRNA研究
基因编辑
基于国际学术界公认的标准流程，维洛信现提供介导基因过表达的慢病毒制备服务。我们采用第三代包装系统系统在293T细胞中进行慢病毒的生产与包装，并建立了完善的纯化和质控方法，生产的慢病毒颗粒可直接应用于各类体内体外试验。
慢病毒优势：
1. 广泛宿主细胞：与逆转录载体不同，能够感染分裂期与静止期细胞；包膜质粒使用疱疹病毒VSVG蛋白，宿主范围更广，包括神经元细胞、肿瘤细胞、心肌细胞、干细胞等多种类型的细胞。
2. 极强感染能力：慢病毒载体具有极高的感染效率，尤其适用于难转染的神经元细胞、干细胞、原代细胞和其他不分化细胞。
3. 长期稳定表达：外源基因整合入基因组，实现持久性表达，可应用于构建稳定细胞系、制备转基因动物等。
4. 低免疫原性：体内实验不易造成非特异性反应与免疫抑制。
5. 高安全系数：尚未发现对人的致病性，已被应用于临床治疗；采用三质粒包装系统，去除致病基因和辅助序列，包装质粒和载体质粒尽量降低同源性，进一步提高了生物安全性。
服务流程：
1. 方案沟通
2. 基因克隆：将目的基因（Gene of Interest）构建入我们的专有慢病毒转移质粒，测序验证
3. 病毒包装：三代慢病毒包装系统（转移质粒pLV-MNG + 包装质粒 + 包膜质粒）共转染入293T细胞
4. 收毒：48 h、72 h孵育后收获培养上清
5. 纯化浓缩：超速离心+超滤， 去除杂质蛋白和DNA；根据不同要求，我们还可应用切向流过滤、离子交换层析、蔗糖梯度离心等方式进一步纯化与浓缩
6. 质量控制：
- 多重酶切质粒鉴定
- p24 ELISA核心蛋白定量
- 细胞转导检测（带有荧光标签）
- qPCR检测病毒滴度
交付内容：
定制慢病毒颗粒
对照病毒（可用于转导测试）
详细实验报告
维洛信慢病毒平台：
1. 三代慢病毒包装系统与严格制备工艺，力求获取最优滴度、活性、纯度与一致性的慢病毒产品
2. 多种优化启动子（CMV, mCMV, CAG, PGK, Ubc等）与报告基因（EGFP、mCherry、EYFP等）或药筛基因（Neo, Puro, Hygromycin等）可供选择，满足您的不同需求
3. 滴度高：维洛信可提供108~109 TU/ml及以上滴度的病毒，满足大部分实验的使用要求
4. 灵活生产：我们提供体外应用级别与体内应用级别各种规格的病毒（小规格、中规格、大规格）的制备服务
5. 具有竞争力的价格与货期
针对不同应用方向，我们提供以下慢病毒制备服务：
用于RNA干扰的慢病毒制备>>
用于表达/抑制microRNA的慢病毒制备>>
用于基因编辑的慢病毒制备>>
