伙伴们，亿鸣复兴十年的技术服务经验，各种细胞实验亲情放送！

环境微生物多样性检测，是以样品中的微生物群落作为整体进行研究，通过对核糖体RNA高变区域（比如16S/18S/ITS等序列）或功能基因（如古菌的氨氧化基因等）进行PCR扩增和测序，然后分析相应环境下微生物群落的多样性和分布规律，对于研究微生物与环境的关系、环境治理和微生物资源利用有着重要的理论和现实意义。16S rDNA：编码原核生物核糖体小亚基rRNA的DNA序列。在结构上分为保守区和可变区，保守区反映生物物种间的亲缘关系，可变区反映物种间的差异。18S rDNA：编码真核生物核糖体小亚基rRNA的DNA序列。在结构上分为保守区和可变区。保守区反映生物物种间的亲缘关系，可变区反映物种间的差异。ITS1/ITS2：ITS1位于真核生物核糖体 rDNA序列18S和5.8S之间，ITS2位于真核生物核糖体 rDNA 序列5.8S和28S之间。ITS区域进化速率是18S rDNA的10倍之多。

细菌具有5S, 16S, 23S三种rRNA，其中5S rRNA序列较短，包含的细菌遗传信息量少，不适合用于分析鉴定细菌种类，而23S rRNA序列较长，且碱基突变速率要比16S rRNA快得多，不适用对较远亲缘关系的细菌进行鉴定。16S rRNA其大小约1500 bp ，所代表的细菌遗传信息量适中，是进行细菌分类研究的理想材料。细菌16S rDNA是细菌染色体上编码16S rRNA的DNA序列，存在于所有细菌染色体基因中，它由保守区序列及可变区序列两部分组成。细菌16S rDNA的可变区序列能够显示细菌间不同分类等级水平上的特异性，适用于进化距离不同的各类生物亲缘关系的研究，并可作为测量细菌进化和亲缘关系的良好工具，同时可以利用可变区序列的差异对不同菌属、菌种的细菌进行分类鉴定。★服务内容：提取客户提供的细菌菌株基因组总DNA，扩增细菌16S rDNA序列，对细菌16S rDNA序列进行序列测定，分析细菌16S rDNA序列信息，确定客户样品细菌种属关系。★您需要提供的信息：1.      试管菌、甘油菌、体积大于500ul的细菌菌液或细菌DNA。2.      所送样品可能的分类地位、已知生长性状、分离环境条件、所提供的DNA纯度等。3.      细菌样品是否具有致病性和潜在危险，如您对样品具有一定的致病性或均有潜在的危险，请您提供细菌DNA。★服务价格1.      细菌16S rDNA部分序列分析：350元/样品2.      细菌16S rDNA全序列分析：550元/样品★服务周期：30样品以下2-5个工作日内递交结果。如遇到特殊情况，我们会及时与您联系，保证尽早发货。30样品以上依据具体样品数量而定。★服务承诺：我们提供给您细菌样品的测序锋图，序列比对结果及完整的结果分析报告。★客户须知：1.      我们的一次性收费包括细菌DNA提取，细菌16S rDNA 序列扩增，扩增产物纯化及16S rDNA序列测序费用。2.      细菌鉴定服务完成后，相应的菌株为您保存1个月，一月后将统一销毁。3.      常温运输时间过长会导致菌体老化，细胞壁难以破碎，因此对于试管菌，建议您使用冰袋运输。4.      如果测序结果出现套峰，视为样品不纯，因实验样品不纯造成的测序套峰，将收取全额实验费用。5.      我们不接受有致病性菌种的鉴定。

 一、技术原理RACE(rapid-amplification ofcDNA ends，RACE) 即cDNA末端快速扩增技术，是基于PCR技术基础上由已知的一段cDNA片段，通过向两端延伸扩增从而获得完整cDNA的5'和3'末端的有效方法，无需构建cDNA文库，即可在短时间内获得目的基因cDNA序列，具有简单、快速、廉价等优势，在cDNA文库的构建及筛选，新基因的发现等方面得到了广泛的应用。  二、服务流程1、3'-RACE的技术利用连有SMART寡核营酸序列通用接头引物的Oligo（dT）30MN作为引物反转录mRNA，形成cDNA链，然后以cDNA为模板，基因特异引物GSP1（gene specific primer，GSP）作为上游引物，含有部分接头序列的通用引物UPM（universal primer，UPM）作为下游引物，PCR扩增目的基因的3' 末端。 2、5'-RACE的技术利用连有SMART寡核营酸序列通用接头引物的Oligo（dT）30MN作为引物和反转录酶MMLV反转录mRNA，形成cDNA。反转录时，利用该反转录酶具有的末端转移酶活性，在cDNA的5'末端自动加上3-5个（dC）残基，退火时（dC）残基与含有寡核苷酸序列Oligo（dG）的通用接头引物配对，进而转换为以SMART序列为模板继续延伸而连上通用接头.最后以含有部分接头序列的通用引物UPM（universal primer，UPM）作为上游引物，目的基因特异引物2（GSP 2 genespecific primer，GSP）作为下游引物， SMART第一链cDNA为模板，PCR扩增目的基因的5'末端。 三、服务内容RNA提取、定量及反转录RACE(3'和 5'-RACE)结果分析及实验报告四、实验报告内容扩增片段的电泳图，含3'和 5'-RACE PCR片段的质粒载体及细菌一份；全长cDNA序列及测序报告；RACE实验步骤、使用仪器、引物序列等。 五、客户提供组织或细胞等材料(不接受RNA样本，除非有足够证据证明您的RNA是高质量)；尽可能多的背景资料，如已知序列、丰度、估计长度、种属同源情况等。 六、实验周期及收费标准服务项目基础费用（500bp以内)超过部分周期（工作日）3'RACE技术服务 3000元200元/100bp15-20工作日5'RACE技术服务 4000元400元/100bp15-20工作日上述收费标准是针对正常基因，对于基因含量低于正常的样品，我们会使用特殊的方法，具体情况请与技术人员沟通协商。服务说明 1、如果您的样品为原核生物，我们无法保证序列为3'端或5'端全长。 2、由于mRNA存在个体和组织差异，PCR产物测序或许会有套峰存在，此种情况之下我们会提供2个克隆的测序结果，由客户最终确认其准确性。

      随着科学技术水平的迅猛发展,人们在科学研究中的新发现及基础研究也更加深入。但大多数科研工作者奋斗在教学研究、临床医学的工作中,或由于技术和设备条件 的限制无法开展多个不同领域的科学实验工作,致使一些好的科研IDEA无法实施,进行实验验证。与此同时,随着生物技术的飞速发展,技术种类日新月异,一 个研究小组掌握所有技术的可能性和必要性也越来越小,未来的生物科研必然是商业服务和各科研机构技术协作、分工越来越细化的局面,并最终形成具有个性化特 色的一站式科研合作服务平台,帮助临床医生或科研院校的科研人员实现他们的IDEA,为生命科学基础研究、新的生物技术与方法的应用、药物靶点的开发、药 物新用途的发现等提供直接的支持。       我们的特色:       1、一站式服务:把您的研究新发现或研究计划与我们分享,我们的技术专家将为您制定合理的科研方案及计划,并有效开展课题的实施,完美实现临床与科研的无缝对接;       2、系统的技术支持:我们的技术专家将在实验前充分与您沟通制定出个性化的科研方案,在实验过程中及时向您报告实验的进展,在实验结束后向您提供规范化的研究报告,并协助您开展有关的论文写作、课题申请工作。
       我们的服务:       1、实验方案的设计;       2、课题整体解决方案;       3、技术检测服务,包括分子生物学平台、细胞生物学平台、免疫学平台、动物实验平台等多个试验平台,能
够提供组织切片制作、IHC免疫组化检测、免疫 荧光检测、PCR检测、realtime-PCR检测、WB检测、载体构建、细胞转染、细胞培养、动物模型制作等实验技术服务;       4、数据统计与分析处理
;       5、论文润色、撰写及发表
;       服务对象:       1、临床医生:奋战在病房一线,有志于科研,却没时间开展科研实验,心有余而力不足者。       
2、硕士、博士或者老师:限于实验设计、实验条件的不完备,限于科研任务繁重、时间有限者。       3、科研任务繁重的领导:公务繁忙,时间和精力不允许查阅文献,寻找领域内最新热点和思路者。       4、生物/制药公司:由于公司技术人员和相应设备的限制,没有很完备实验条件者。           承接的实验项目 分子生物学类:   引物设计合成、基因测序   全基因合成,密码子优化   DNA、RNA 提取、回收、纯化   RT-PCR 实验技术服务   实时荧光定量 PCR 技术服务   EMSA 实验技术服务   原位杂交技术服务   基因克隆突变服务   质粒与载体构建服务   Northern、Southern 技术服务   RIA(放射免疫法)技术服务   ELISA(酶联免疫吸附法)技术服务细胞生物学:   MTT 检测   细胞周期检测   流式细胞术检测凋亡   细胞原代、传代培养   细胞模型构建、转染病理类:   扫描电镜技术服务   透射电镜技术服务   HE 染色/特殊染色/技术服务   免疫组化,免疫荧光实验服务   Tunel(原位末端凋亡法)技术服务   激光共聚焦病毒介导基因调控类:   腺病毒载体构建、包装、纯化、鉴定   慢病毒载体构建、包装、纯化、鉴定   腺病毒扩增   基因过表达实验服务   siRNA 化学合成
   shRNA 设计和构建   RNAi(基因沉默)整体实验服务   转基因动物制备   蛋白双向电泳实验服务   质谱分析   蛋白质 N 端测序   酵母双杂交系统   免疫沉淀   蛋白原核表达蛋白质与免疫学:   蛋白纯化
   多肽合成
   多肽修饰   单克隆抗体制备   多克隆抗体纯化   Western-blot 实验服务芯片类:   Oligo 基因芯片   功能分类基因芯片(PCR 芯片)   microRNA 芯片(9.2 版)技术服务   microRNA 芯片(10.1 版)技术服务   荧光高通量抗体芯片   细胞因子抗体芯片   转录因子芯片(蛋白/DNA 芯片)   表达谱及甲基化芯片细胞模型与动物模型:   原代细胞培养   分子靶向药物筛选模型   心肌缺血模型   移植肿瘤裸鼠模型   动脉粥样硬化模型   鸭乙肝新药筛选   类风湿关节炎模型MicoRNA 系列研究:   MicoRNA 芯片检测
   MicoRNA 生物信息数据分析   MicoRNA 动物实验   MicoRNA 蛋白水平实验   MicoRNA 实时定量 PCR 检测   MicoRNA 慢病毒介导基因调控科研方案设计与 SCI 相关服务:   科研文献论著翻译
   SCI 论文翻译、编辑、协助发表   临床实验/科研实验设计方案指导   近期促销，欢迎咨询！        联系人：曲经理    电话：18911058270       QQ:297202013    邮箱：quling@ymbio.com

伙伴们，亿鸣复兴十年的技术服务经验，各种细胞实验亲情放送！

 一、技术原理RACE(rapid-amplification ofcDNA ends，RACE) 即cDNA末端快速扩增技术，是基于PCR技术基础上由已知的一段cDNA片段，通过向两端延伸扩增从而获得完整cDNA的5'和3'末端的有效方法，无需构建cDNA文库，即可在短时间内获得目的基因cDNA序列，具有简单、快速、廉价等优势，在cDNA文库的构建及筛选，新基因的发现等方面得到了广泛的应用。  二、服务流程1、3'-RACE的技术利用连有SMART寡核营酸序列通用接头引物的Oligo（dT）30MN作为引物反转录mRNA，形成cDNA链，然后以cDNA为模板，基因特异引物GSP1（gene specific primer，GSP）作为上游引物，含有部分接头序列的通用引物UPM（universal primer，UPM）作为下游引物，PCR扩增目的基因的3' 末端。 2、5'-RACE的技术利用连有SMART寡核营酸序列通用接头引物的Oligo（dT）30MN作为引物和反转录酶MMLV反转录mRNA，形成cDNA。反转录时，利用该反转录酶具有的末端转移酶活性，在cDNA的5'末端自动加上3-5个（dC）残基，退火时（dC）残基与含有寡核苷酸序列Oligo（dG）的通用接头引物配对，进而转换为以SMART序列为模板继续延伸而连上通用接头.最后以含有部分接头序列的通用引物UPM（universal primer，UPM）作为上游引物，目的基因特异引物2（GSP 2 genespecific primer，GSP）作为下游引物， SMART第一链cDNA为模板，PCR扩增目的基因的5'末端。 三、服务内容RNA提取、定量及反转录RACE(3'和 5'-RACE)结果分析及实验报告四、实验报告内容扩增片段的电泳图，含3'和 5'-RACE PCR片段的质粒载体及细菌一份；全长cDNA序列及测序报告；RACE实验步骤、使用仪器、引物序列等。 五、客户提供组织或细胞等材料(不接受RNA样本，除非有足够证据证明您的RNA是高质量)；尽可能多的背景资料，如已知序列、丰度、估计长度、种属同源情况等。 六、实验周期及收费标准服务项目基础费用（500bp以内)超过部分周期（工作日）3'RACE技术服务 3000元200元/100bp15-20工作日5'RACE技术服务 4000元400元/100bp15-20工作日上述收费标准是针对正常基因，对于基因含量低于正常的样品，我们会使用特殊的方法，具体情况请与技术人员沟通协商。服务说明 1、如果您的样品为原核生物，我们无法保证序列为3'端或5'端全长。 2、由于mRNA存在个体和组织差异，PCR产物测序或许会有套峰存在，此种情况之下我们会提供2个克隆的测序结果，由客户最终确认其准确性。

细菌具有5S, 16S, 23S三种rRNA，其中5S rRNA序列较短，包含的细菌遗传信息量少，不适合用于分析鉴定细菌种类，而23S rRNA序列较长，且碱基突变速率要比16S rRNA快得多，不适用对较远亲缘关系的细菌进行鉴定。16S rRNA其大小约1500 bp ，所代表的细菌遗传信息量适中，是进行细菌分类研究的理想材料。细菌16S rDNA是细菌染色体上编码16S rRNA的DNA序列，存在于所有细菌染色体基因中，它由保守区序列及可变区序列两部分组成。细菌16S rDNA的可变区序列能够显示细菌间不同分类等级水平上的特异性，适用于进化距离不同的各类生物亲缘关系的研究，并可作为测量细菌进化和亲缘关系的良好工具，同时可以利用可变区序列的差异对不同菌属、菌种的细菌进行分类鉴定。★服务内容：提取客户提供的细菌菌株基因组总DNA，扩增细菌16S rDNA序列，对细菌16S rDNA序列进行序列测定，分析细菌16S rDNA序列信息，确定客户样品细菌种属关系。★您需要提供的信息：1.      试管菌、甘油菌、体积大于500ul的细菌菌液或细菌DNA。2.      所送样品可能的分类地位、已知生长性状、分离环境条件、所提供的DNA纯度等。3.      细菌样品是否具有致病性和潜在危险，如您对样品具有一定的致病性或均有潜在的危险，请您提供细菌DNA。★服务价格1.      细菌16S rDNA部分序列分析：350元/样品2.      细菌16S rDNA全序列分析：550元/样品★服务周期：30样品以下2-5个工作日内递交结果。如遇到特殊情况，我们会及时与您联系，保证尽早发货。30样品以上依据具体样品数量而定。★服务承诺：我们提供给您细菌样品的测序锋图，序列比对结果及完整的结果分析报告。★客户须知：1.      我们的一次性收费包括细菌DNA提取，细菌16S rDNA 序列扩增，扩增产物纯化及16S rDNA序列测序费用。2.      细菌鉴定服务完成后，相应的菌株为您保存1个月，一月后将统一销毁。3.      常温运输时间过长会导致菌体老化，细胞壁难以破碎，因此对于试管菌，建议您使用冰袋运输。4.      如果测序结果出现套峰，视为样品不纯，因实验样品不纯造成的测序套峰，将收取全额实验费用。5.      我们不接受有致病性菌种的鉴定。

原核蛋白表达系统是迄今为止最为成熟可靠的蛋白表达系统，能快速表达纯 化各种不同来源蛋白。所制备的重组蛋白可用于药物筛选、结构生物学研究、细胞生物学研究、蛋白质组学研究等的一系列生物医学领域的研究。本公司拥有完整的杆菌原核表达技术平台：根据客户的需求，提供从质粒构建，基因表达，蛋白纯化等一系列服务。★ 服务内容：1.      靶基因序列设计，密码子优化2.      靶蛋白cDNA阅读框的设计和全长基因合成3.      表达载体的构建4.      质粒的转化和高表达菌株的筛选5.      转化菌摇瓶培养，诱导表达6.      目标蛋白纯化7.      SDS-PAGE 检测表达及纯化情况★ 您需要提供的信息：1.      提出具体可行的实验方案提供含有目的基因序列2.      确认的质粒或带有此质粒的菌株提供测序确认的目的基因PCR产物3.      提供目的蛋白编码基因信息（序列或NCBI登陆号），与客户共同分析后提出    具体可行的实验方案并付诸实施。★ 服务价格具体价格面谈，根据实验难易及客户要求而定。★ 服务周期：20个工作日。★ 服务承诺：1.       初步的培养条件和合理的纯化工艺；纯化后的蛋白2.       SDS-PAGE蛋白电泳结果和详细的实验记录。3.       详细的实验报告（包括实验方法，步骤，照片，相关数据、SDS-PAGE及质粒测序结  果等）测序彩色波形图，测序方向图，序列碱基图，酶切位点图，含有目的基因的质粒及甘油菌。★ 客户须知：1.      客户需要提供尽量详细的背景资料。2.      如果提供给我们质粒或PCR产物请提供给我们测序结果峰图。

载体构建是分子生物学研究中最常用到的手段之一。但由于影响因素较多，对研究者经验要求较高，因而往往费时费力。我公司凭借长期分子生物学工作的丰富经验，为您提供高效、快捷的服务。可根据已有载体进行改造方案的设计，完成现有载体不同功能元件的改造，也可以应客户要求将指定片段亚克隆至各载体。★ 服务内容：1.      构建或改造特定的载体，将目的基因装载到特定的载体上。2.      已有载体多克隆位点（MCS）的改造；启动子、增强子、筛选标志物等功能元件的改造。★ 您需要提供的信息：1.      克隆要求及相关的实验材料，图谱，以及构建方案。克隆完成后如需测序并且要求序列完全匹配，则需提供全序列。2.      载体改造的具体要求，预进行改造的质粒（序列经测序验证正确）及其图谱和序列，能够获得所需元件或基因的模板（质粒或其它）及其相关图谱和序列。3.      对于载体改造和基因片段克隆，客户需要提供载体、PCR产物或酶切产物、以及载体来源及基因背景资料等。4.      对于表达载体、报道基因载体与病毒载体的构建，您需要提供含有目的基因的质粒或cDNA克隆模板、序列资料、目标蛋白的基因序列与酶切位点、以及载体等资料。5.      若客户只提供组织或细胞样本，请提供所需克隆基因的NCBI登录号或电子版全序列。6.      客户自带的载体需提供详细的酶切图谱及相关信息。★ 服务价格具体价格面谈，根据实验难易及客户要求而定。参考报价如下：服务项目收费标准基因表达载体构建（<500bp）1200元基因表达载体构建（500bp-2000bp）1600元基因表达载体构建（>2000bp）2200元起★ 服务周期：20个工作日。★ 服务承诺：我们提供给您详细的实验报告（包括实验方法、照片图片等）、测序结果（测序彩色波形图、测序方向图、序列碱基图）、酶切位点图、电泳图谱，测序图谱，酶切图、构建好的重组质粒及含该质粒的穿刺菌等。★ 客户须知：1.      若客户提供组织或细胞样本，我们公司将额外收取RNA提取及逆转录的费用。2.      我们公司可以免费提供常见的克隆载体，如pMD18等。